संक्रामक बोवाइन राइनोट्रैकाइटिस वायरस एंटीबॉडी एलिसा डिटेक्शन किट

मॉडल नम्बर:वीडी105ई
संक्षिप्त: आईबीआरवी अब एलिसा
नमूना: सीरम

विवरन

विनिर्देश

बीवीडीवी अब एलिसा

इच्छित उपयोग: संक्रामकबोवाइन राइनोट्रैकाइटिस वायरसएंटीबॉडी एलिसा डिटेक्शन किट का उपयोगसंक्रामक राइनोट्रैकाइटिस का निर्धारित कराइन विट्रो मा गोजातीय सीरम मा वायरस एंटीबॉडी।

नमूना: सीरम

प्रदान कीन गा सामग्री:

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

परीक्षण प्रक्रिया अऊर व्याख्या

चरण 1 परीक्षण प्रक्रिया

1.1 धोवै के घोल के तैयारी

Wऑर्किंग एकाग्रता wराख तरल:उपयोग से पहिले, धोवै के घोल का कमरा के तापमान (20-25 डिग्री) पर बहाल कीन जाय अऊर एक समान बनावै के लिए समान रूप से हिलावा जाय। फिर शुद्ध पानी से गाढ़ा धोने के घोल का 20 गुना पतला करौ (उदाहरण के लिए, 95 मिलीलीटर शुद्ध पानी मा 5 मिलीलीटर गाढ़ा धोने का घोल मिलावा जात है), अच्छी तरह से मिलावा जाय, अऊर पतला धोवै के तरल का 7 दिन तक 2-8 डिग्री पर संग्रहीत कीन जा सकत है।

1.2 नमूना तैयारी

पूरा जानवरन का खून लीन गा रहा, 10 मिनट के लिए 4000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज कीन गा रहा, अऊर सुपरनेटेंट एकत्र कीन गा रहा। सीरम का हेमोलिसिस के बिना प्राकृतिक रूप से भी जमा कीन जा सकत है।

सीरम पतला करै वाली प्लेट मा परीक्षण करै वाले सीरम का 50 बार पतला करा (उदाहरण के लिए: 147ul नमूना पतला करै वाले मा परीक्षण करै वाले सीरम का 3ul जोड़ौ)।

नोट: नकारात्मक अऊर सकारात्मक नियंत्रणन का पतला करै के जरूरत नाहीं है

1.3 परीक्षण प्रक्रिया

1एंजाइम लेबल माइक्रोप्लेट लें (नमूना के संख्या के अनुसार, कई बार अलग अऊर उपयोग कीन जा सकत है), एंजाइम लेबल माइक्रोप्लेट मा पतला सीरम के 100ul जोड़ौ, नकारात्मक नियंत्रण अऊर सकारात्मक नियंत्रण के लिए प्रत्येक दुइ कुँआ सेट करा, अऊर क्रमशः प्रतिक्रिया कुँआ मा 100ul जोड़ौ। प्लेट का ढँकय के लिए सीलिंग प्लेट फिल्म का उपयोग कइके, कुँआ मा नमूना का धीरे से हिलावा, अऊर 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन करा।

②सीलिंग प्लेट फिल्म का खोलौ, प्लेट के कुँआ मा घोल का हिलावा, हर कुँआ मा 300μl काम करै वाली एकाग्रता धोवै वाला तरल मिलावा, अऊर फिर कुँआ मा तरल का फेंक द्या। ऊपर के चरणन का 5 बार दोहरावा, अऊर अंत मा एक साफ शोषक कागज पर थपथपा के सूखावा।

3पतला एंजाइम संयुग्म: एंजाइम संयुग्म (80×) का 80 बार पतला करा (उदाहरण के लिए: 10ul एंजाइम संयुग्म सांद्रता + 790ul नमूना पतला, आवश्यक विशिष्ट मात्रा परीक्षण नमूना के संख्या के अनुसार गणना कीन जात है), अच्छी तरह से मिलावा अऊर अलग रखवा।

4प्रत्येक कुँआ मा 100μl एंजाइम संयुग्म डालौ, प्लेट का ढकौ, अऊर 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन करा।

एंजाइम प्लेट धोवै, विशिष्ट संचालन ऊपर 2 के समान है।

6प्रत्येक कुँआ मा 100μl सब्सट्रेट घोल डालौ, प्लेट का ढकौ अऊर प्रकाश से 37 डिग्री दूर 10 मिनट तक ऊष्मायन करा।

चरण 2 परिणाम व्याख्या

हर कुँआ के ओडी450 मान 96-कुँआ माइक्रोप्लेट रीडर पर पढ़ा गा रहा।

2.1 सत्यापन नकारात्मक नियंत्रण का औसत OD450nm मान < 0.25 रहा अऊर सकारात्मक नियंत्रण का औसत OD450nm मान 0.6 से अधिक या बराबर रहा, प्रयोगात्मक परिणाम मान्य रहे। नाहीं तौ, परीक्षण दोहरावा जाय।

2.2 गणना विधि

हर नमूना के लिए, सही नमूना अऊर नियंत्रण मानन का उपयोग कइके निम्नलिखित रूप से एस/पी के गणना करा:

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2.3 परिणाम व्याख्या

जब S/P < 0.2 होत है, तौ ई नकारात्मक माना जात है।

जब S/P > 0.3 होत है, तौ ई सकारात्मक माना जात है।

जब 0.2 S/P से कम या बराबर 0.3 से कम या बराबर होत है, तौ ई संदिग्ध माना जात है, अऊर एक सप्ताह बाद नमूनाकरण अऊर परीक्षण दोहरावै का सुझाव देत हैं।

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